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“一种淡水鱼类精子扫描电镜样品制备方法”获国家发明专利授权
2013-12-09 00:00:00  来源:

日前,由买球app黑龙江水产研究所耿龙武助理研究员等人完成的“一种淡水鱼类精子扫描电镜样品制备方法”获得国家发明专利授权,专利号为:ZL 201210046338.1。

该专利解决了传统方法脱水、干燥、粘样等过程中,容易因表面张力变化和外力机械损伤而引起精子开裂或龟裂 、断裂等,使得表面结构被破坏,导致观察效果差和难于买球app进行微细形态学分析的问题。

与传统方法相比,本方法在样品脱水与干燥、密度控制、样品台载体、点样方式等环节买球app进行改进,制备过程由固定液配制、样品固定、样品台准备、样品滴片、样品镀膜完成。本发明优点在于:本发明的优点在于:1)精子固定后的样品不经过乙醇脱水、干燥,可避免因表面张力变化而引起精子断裂、开裂或龟裂等表面结构破坏;2)精液固定后经PBS磷酸盐缓冲液冲洗2~3次,可去除精浆等其它成分,使样品电镜观察时更清晰;3)精子滴片前用PBS磷酸盐缓冲液稀释成浓度数量级为106~107个/ml,使精子分散均匀、密度适中,利于获得单个精子完整形态观察结果;4)先粘贴盖玻片、后滴片,可避免样品受到外力机械损伤;5)滴片时采用微量加样枪,并用针头分散滴液,可避免样品层太厚影响观察效果;6)镀膜仪喷金时间控制在90~110s,使精子样品表面金膜厚度为9~11nm,可避免电镜观察时精子头部与鞭毛光线反差过大。

本发明的技术特点是方法简便、易操作,精子完整率高、分布密度适中,技术成本低,可应用于淡水鱼类精子扫描电镜样品的制备。


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